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使用分光光度計檢測中影響標(biāo)準(zhǔn)曲線質(zhì)量的幾個因素！
日期：2025-12-23 00:11
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摘要：轉(zhuǎn)自于食品實驗室服務(wù) 檢驗檢測機(jī)構(gòu)學(xué)習(xí)圈
溶液濃度變化
溶質(zhì)隨溶液濃度變化而出現(xiàn)電離、解離或聚合的程度，或與顯色劑生成有色物的配位數(shù)發(fā)生改變，會使光度法測定不符合比耳定律。
單色光純度不夠
光度法中要求在*大吸收峰處測定吸光度，因此要求光度計的有效譜帶寬度越窄越好，有利于獲得純度高的單色光。當(dāng)單色光純度不夠，即有效譜帶寬度不夠窄時，測定的吸光度偏低，濃度越高，測得的吸光度偏低越多，致使標(biāo)準(zhǔn)曲線上端向下彎曲。
比色皿的厚度或光學(xué)性能不一致
如果裝試劑空白液的比色皿較其它比色皿薄或?qū)獾奈蘸头瓷渖僖恍?，則曲線的延線與縱坐標(biāo)相交；反之，與橫坐標(biāo)相交。因為各測點i:=Ai-A0，當(dāng)裝空白液的比色皿較薄時，A0值偏低，Yi=Ai-A0值偏高，反之，Yi值偏低。
顯色反應(yīng)和反應(yīng)條件的問題
當(dāng)顯色反應(yīng)的靈敏度不高時，被測物低于某一濃度就不能顯色，當(dāng)濃度不同時，溶液對光的吸收、散射的程度不同，低濃度段往往彎曲，加上濃度高時部分膠體顆粒的聚沉，致使測定的吸光度降低，曲線上端向下彎曲。
操作上的原干擾物質(zhì)的影響
例如褪色反應(yīng)，顯色溶液的顏色不穩(wěn)定，易褪色，若比色時間超過了穩(wěn)定時間，標(biāo)準(zhǔn)系列中高濃度溶液顏色減褪，致使曲線上端向下彎曲。因此應(yīng)控制好顯色劑的加入時間，可以每加3份，停3～3min，再加上3份，依次進(jìn)行，以使每支比色管的顯色時間相近。
